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2016年高考生物:基础知识同步练习(14)

来源:考试吧 2016-1-21 11:18:07 要考试,上考试吧! 模拟考场
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  考点《血红蛋白的提取与分离》

  思维激活

  判断正误

  (1)利用凝胶色谱法分离蛋白质时,相对分子质量小的先洗脱出来(  )。

  (2)在电泳过程中,蛋白质分子的移动速度,与分子本身的大小和形状无关,而与所带电荷的差异有关(  )。

  (3)在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中,电泳迁移率完全取决于分子的大小(  )。

  答案 (1)× (2)× (3)×

  血红蛋白提取和分离过程的考查

  (·广东理综,5)以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的是(  )。

  A.洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂

  B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少

  C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测

  D.在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢

  解析 猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少,是提纯血红蛋白的理想材料。提纯血红蛋白分四步:红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析,其中洗涤红细胞时,要用生理盐水反复洗涤,既要将红细胞洗涤干净,又要不破坏红细胞,然后再用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂,释放出血红蛋白。分离提纯的血红蛋白时用凝胶色谱法,是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质,相对分子质量大的蛋白质移动速度较快;血红蛋白的颜色可用于观察红色区带的移动情况,并据此判断分离效果。

  答案 D

  [对点强化]

  红细胞中含有大量的血红蛋白,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。下列关于血红蛋白提取和分离的叙述,错误的是(  )。

  A.血红蛋白提取和分离一般按照样品处理―→粗分离―→纯化―→纯度鉴定的顺序进行

  B.纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液

  C.粗分离中透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质

  D.可经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定

  解析 蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。提取和分离血红蛋白时,首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液,即样品处理;再通过透析法除去相对分子质量较小的杂质,即样品的粗分离;然后通过凝胶色谱法将相对分子质量较大的杂蛋白除去,即样品纯化,纯化过程中凝胶应用蒸馏水充分溶胀后,配制成凝胶悬浮液,而不是用生理盐水;最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。

  答案 B

  归纳比较

  1.分离DNA、PCR技术、分离蛋白质的比较

  分离DNA PCR技术 分离蛋白质 实验原理 DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同,且不溶于冷酒精 利用DNA热变性原理体外扩增DNA 依据相对分子质量的大小不同来分离蛋白质 实验过程 选取材料―→破碎细胞释放DNA―→除杂―→DNA析出与鉴定 变性―→复性―→延伸 样品处理―→凝胶色谱操作 实验结果 获得较纯净的DNA 获得大量DNA 相对分子质量不同的蛋白质得以分离 实验意义 为DNA研究打下基础 解决了DNA研究中材料不足的问题 为蛋白质的研究和利用提供了原材料 2.比较琼脂糖凝胶电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

  (1)从载体上看,利用琼脂糖凝胶作为载体的是琼脂糖凝胶电泳,利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶作为载体的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。

  (2)从依据上看,利用了分子带电性质差异和分子大小的是琼脂糖凝胶电泳,仅利用了分子大小的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。

  (3)从优点上看,琼脂糖凝胶电泳操作简单,电泳速度快,样品不需处理,电泳图谱清晰,分辨率高,重复性好;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳消除了净电荷对迁移率的影响,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。

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