【真题】
39.空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度的沉降,某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况,实验步骤如下:
①配制培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);
②制作无菌平板;
③设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作;
④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。
回答下列问题:
(1)该培养基中微生物所需的氮来源于。若要完成步骤②,该培养基中的成分X通常是。
(2)步骤③中,实验组的操作是。
(3)若在某次调查中,某一实验组平板上菌落平均数为36/平板,而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了现象。若将30(及36-6)个/平板作为本组菌落数的平均值,该做法(填“正确”或“不正确”)
【解析】
先看39题,考察微生物培养知识。题干的这个实验要收集微生物,然后看一看,把它进行培养,然后划线等这种活干完之后,看到底能长出多少来。
步骤为先配置培养基,养细菌,给予养分,成份牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X和水,制作无菌平板,设置空白对照组和若干实验组进行相关的操作,将各族平板置于37摄氏度恒温箱当中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。这些板放在不同高度,自由沉降。拿对照组,空白的,不让它落上细菌。所以整个实验过程当中,我们把这个过程弄清楚,就可以做题了。
该培养基当中的微生物所需要的氮来源于什么?来自于三大营养物质当中哪一种蛋白质,蛋白胨出现了蛋白两个字,显然是蛋白胨这个东西里面有氮。若要完成步骤二,制作无菌平板,显然要做平板,是不是这些牛肉膏、蛋白膏配起来,煮起来,高压之后,能不能形成固体平板?不可以。成份是什么?通过加入琼脂,可以冷却下来之后,形成固体形状,跟果冻一样。
步骤三,实验操作的时候,设计空白对照组和若干实验组,实验组操作,实际上就是把置备好的无菌平板打开,这个平板制作过程当中,一定在无菌的操作台当中,到平板,到完平板以后,无菌情况下,打开,放置在教室不同高度,开始落菌落,落上以后,相同时间之后,盖好盖子,然后再进行培养,就是在恒温箱当中培养。所以这里要控制好电量。
实验做完了,进行数据调查,若在此调查当中,某一实验组平板上的菌落,平均数为36每平板,而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落,这种结果说明出现什么现象?空白对照组的话,要保证它是空白的,尽量是在无菌的情况下进行操作,显然出现了菌落,说明对空白对照组出现了污染现象。
如果将30及36 -6平板作为本组菌落数的平均值,能不能行?它是想说,如果空白平板上出现了六个菌落,如果我们把这个平均数减去6,算出30来,用这个数作为平均值行不行?显然这个实验出现了污染。污染的话,就不能再把空白组作为没有细菌来算了,而且空白的平板上出现菌落原因又是什么?不好说。所以不能把空白平板出现菌落原因,归结到微生物沉降上,所以不能把平均数减去6,作为平均值。显然不管从生物试验上,还是从数学角度上来说,都不符合平均值的求法,所以这个说法是不正确的。
【真题】
40. 某一质粒载体如图所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr导入相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamHⅠ酶切后,与BamHⅠ酶切获得的目的基因混合 ,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因,含有质粒载体,含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题;
(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有(答出两点即可),而作为基因表达载体,除满足上述条件外,还需具有启动子和终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化或仅含环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是;并且和的细胞也是不能区分的,其原因是。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落,还需使用含有的固体培养基。
(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需要的原料来自于
。
【解析】
40题,考察的是基因工程。AMP表示的氨苄青霉素抗性基因,TET表示四环素抗性基因,两个搞清楚,再进行下面的。质粒载体作为基因工程的工具,应该具备的基本条件有,答两点,含有标记基因,一个或者多个酶切入,能够不伤害细胞。
青霉素筛选,上述大肠杆菌未被转化,或者含环状目的的基因细胞不能被区分,这是什么原因?因为含有氨苄青霉素抗性基因,含有氨苄青霉素培养肌上都能成长。给了这几种东西的话,其实让你区分,有的能成长,有的不能成长。拿两个不能成长和两个能成长的进行比较,当然都不能区分,所以若要筛选含有插入目的基因重组大肠杆菌菌落,还需要使用含有什么培养基,含有四环素的固定培养基。
基因工程当中,某些噬菌体经过改造后,可以作为载体,其DNA复制所需要的原料来自于什么,大肠杆菌,显然又考了一遍。
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